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    共表達抗原的工作

    發(fā)布時間: 2024-05-23  點擊次數(shù): 575次

    抗原間的相互關(guān)系分為三種,分別是互斥關(guān)系、子代與親代的關(guān)系和共表達關(guān)系。


    互斥關(guān)系是指兩種抗原不會同時表達在一中細胞上,即表達A不表達B,表達B不表達A。配色時,互斥的抗原是允許熒光溢漏的。


    子代與親代關(guān)系是指抗原之間是上下級關(guān)系,即下級抗原是在上級抗原的基礎上進行分析的。


    共表達關(guān)系是指兩種抗原同時表達在一種細胞上。配色時,共表達抗原要搭配熒光干擾較小的熒光素,盡量避免熒光溢漏。


    什么樣的抗原屬于共表達抗原呢?以Treg細胞為例,Treg細胞同時表達CD25和Foxp3,那么CD25和Foxp3就屬于共表達關(guān)系。在這種情況下,CD25和Foxp3需要搭配相互之間沒有溢漏的熒光素,比如搭配APC和PE,因為這兩個熒光素是幾乎沒有干擾的,因此可獲得預期的數(shù)據(jù)結(jié)果。


    在多色流式實驗中,如果兩個共表達Marker使用的熒光染料之間干擾較嚴重,則會對圈門造成干擾,影響實驗結(jié)果的準確性。雖然我們也能通過調(diào)節(jié)補償來減少光譜重疊的影響,但對被干擾通道熒光靈敏度降低的影響是無法通過后續(xù)的結(jié)果分析來消除的。

    共表達抗原的工作共表達抗原的工作


    圖2. 熒光干擾的影響


    如果共表達抗原之間有嚴重熒光干擾會怎么樣呢?那結(jié)果就可能出現(xiàn)如上圖右所示的情況,雖然進行了補償調(diào)節(jié),但得到的目的細胞的比例跟實際有差別。




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