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    細胞被支原體污染怎么辦?

    發(fā)布時間: 2024-04-29  點擊次數(shù): 616次

    支原體是什么?如何判斷細胞是否被支原體感染?如果感染了,細胞應(yīng)該如何處理?

    以上三個問題,大多數(shù)養(yǎng)細胞的同學(xué)都會遇到,我們今天就講一下支原體污染的問題。

    細胞被支原體污染怎么辦?


    支原體,是一種沒有細胞壁結(jié)構(gòu),在獨立生活和細胞內(nèi)寄生之間存活的原核生物,其結(jié)構(gòu)和典型的細菌相近。

    部分支原體可以致病,例如肺部支原體。由于支原體沒有細胞壁,許多常見的抗生素,如青霉素對其沒有殺傷力。

    和常見的細菌污染不同,細胞被支原體污染后,采用常規(guī)顯微鏡無法直接在明場視野下看到支原體,后者也并不會直接破壞宿主細胞結(jié)構(gòu),而是改變細胞的代謝。

    所以,細胞往往表現(xiàn)出生長狀態(tài)變差,例如生長緩慢,不像細菌污染那樣大量死亡。因此,被支原體污染的細胞是很難察覺出異樣的。

    細胞被支原體污染怎么辦?

    那么,如何判斷細胞是否被支原體污染呢?

    常用的方法有熒光染色、PCR、ELISA、免疫染色、放射自顯影以及微生物學(xué)分析。

    對于大多數(shù)同學(xué)而言,最簡的辦法,應(yīng)該是采用熒光染色。具體來說,就是使用Hoechst 33258對細胞進行染色。

    其原理是被染色后的細胞,在50X或100X目鏡下觀察,可以看到細胞核呈藍色熒光,細胞內(nèi)染色質(zhì)上有明確的藍色熒光微?;蚪z狀物,后者就是支原體的標志特征。

    細胞被支原體污染怎么辦?

    動物細胞培養(yǎng) 第7版 配圖

    使用Hoechst 33258進行染色的實驗方法見下圖(參考資料:動物細胞培養(yǎng) 第7版。

    如果實驗室有條件的同學(xué),也可以直接購買商業(yè)化的檢測試劑盒,這樣會更加方便和高效。

    細胞被支原體污染怎么辦?

    我們之前講過,如果細胞被微生物污染,例如細菌,那么應(yīng)該直接把被污染的細胞清理掉,而不是嘗試挽救。

    同理,當(dāng)細胞被確認感染了支原體后,第一選擇的處理措施依然也是清理掉污染的細胞。

    除非該細胞非常重要,或無法替代,此時我們可以嘗試去除支原體污染。以下,我們也為大家分享支原體清除的實驗操作建議。(參考資料:動物細胞培養(yǎng) 第7版)

    細胞被支原體污染怎么辦?

    細胞被支原體污染怎么辦?

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